Medyczna fundacja dantis

Funkcjonalna ekspresja zmutowanego nabłonka pseudohypoaldosteronizmu typu I na kanale Na + pozbawionym regionu tworzącego pory jego podjednostka cd

1 września 2019 by admin

Cztery dni po iniekcji oocyty utrwalano 3% paraformaldehydem (Merck KGaA, Darmstadt, Niemcy) w PBS przez 4 godziny w temperaturze 4 ° C. Do immunochemii użyto zestawu do amplifikacji sygnałów tyramidowych (TSA-Direct, NEN Life Science Products Inc., Boston, Massachusetts, USA). Krioskrawki (o grubości 6. M) inkubowano przez godzinę z rozcieńczonym 1: 100 przeciwciałem anty-FLAG IgG (Kodak). Po płukankach inkubowano je przez godzinę z rozcieńczeniem 1: 100 sprzężonej z peroksydazą chrzanową owczej anty-mysiej immunoglobuliny (Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, Szwecja), następnie ujawniano przez inkubację przez 10 minut z dostarczonym tyrozydem fluoresceiny. koniugaty rozcieńczone 1:50. W celu znakowania cytoszkieletu F-aktyny błony komórkowej oocytu, do buforu amplifikacyjnego dodano rozcieńczenie 1:50 związanej z rodaminą falloidyny (Molecular Probes Inc., Eugene, Oregon, USA). Skrawki zostały zamontowane za pomocą DAKO-Glycergel (DAKO Corp., Glostrup, Dania) zawierającego 2,5% 1,4-diazabicyklo [2.2.2] oktanu jako opóźniacza zaniku (Sigma Chemical Co., Buchs, Szwajcaria) i badano przez epifluorescencję z mikroskopem Polyvar (Reichert-Jung, Wiedeń, Austria). Zdigitalizowane obrazy zostały pozyskane za pomocą kamery VISICAM CCD (Visitron, Puchheim, Niemcy) i przetworzone przez oprogramowanie Image-Pro Plus (wersja 3.0, Media Cybernetics, Silver Spring, Maryland, USA). Dla każdego oocytu użyto identycznych ustawień. Wyniki Szczurze i ludzkie mutacje typu stop ENAC umożliwiają znaczącą ekspresję aktywnych kanałów. Mutacja stop (R508stop) stwierdzona u pacjentów z PHA-I przerywa 46 aminokwasów białka ENaC przed przewidywaną a-helisą drugiej domeny transbłonowej (M2), usuwając tę domenę, domenę poprzedzającą M2 (pre-M2) i wewnątrzkomórkowy koniec COOH. Zachowuje jednak dużą część pętli pozakomórkowej i 2 skrzynki bogate w cysteinę, charakterystyczne dla nadrodziny genu ENaC (14) (rysunek 1). Wprowadziliśmy mutację stop w podjednostce szczurzy. ENaC w równoważnej pozostałości (. L535stop) i poddajemy ją koekspresji. i . szczur ENaC. Przy pomiarze metodą 2-elektrodowej napięciowo-zaciskowej, odtwarzalne czułe na amiloryd prądy zapisywano z oocytów. L535stop ., które wstrzyknięto, osiągając 13% prądów zmierzonych w. Oocytach wstrzykniętych 4 dni po wstrzyknięciu (Figura 2, a. .do). Prądy te były znacznie wyższe niż te zarejestrowane w oocytach, którym wstrzyknięto. podjednostki (P <0,001 w dniach 3 i 4 po wstrzyknięciu) lub wodą (P <0,001 w dniach 3. 6) (Figura 2b). Trzy różne kinetyki pojawiania się makroskopowego wrażliwego na amiloryd prądu Na + można było zaobserwować w okresie po wtrysku (Figura 2, aib). (a) W . Oocyty wstrzyknięte przez rENaC, prądy wrażliwe na amiloryd były już wykrywalne po kilku godzinach i osiągnęły szczyt w drugim dniu po wstrzyknięciu. (b) Oocyty wstrzyknięte. L535stop. wykazują wolniejszą kinetykę, osiągając szczyt po 4 dniach. (c) Nieoczekiwanie, wrażliwe na amiloryd prądy rejestrowano z oocytów, którym wstrzyknięto. rENaC (między 0,5 a 2 A) 6 dni po wstrzyknięciu (znacznie wyższe niż oocyty z iniekcją wody; P <0,001). Ich maksymalna ekspresja została zarejestrowana w siódmym dniu. Rysunek 1. Skrócone podjednostki ENaC odnotowano w recesywnym PHA-I. Pierwotna struktura typu dzikiego (WT) i przewidywane delecje. podjednostki są zilustrowane. M1 i M2 oznaczają pierwszą i drugą domenę transbłonową; P oznacza domenę pre-M2 drugiej domeny transbłonowej. CRB1 i CRB2 oznaczają pudełka i 2 bogate w cysteinę. Obydwie mutacje delecji zgłoszone dla pacjentów z PHA-I (ludzki R508stop i ludzki AI68fr) przewidują przerwanie. podjednostki przed domenami M2 i M1 obejmującymi błonę. Figura 2 (a) Przebiegi czasowe makroskopowego prądu czułego na amiloryd typu dzikiego, L535stop i Oocyty wstrzyknięte przez szczurze ENaCa. Oocytom wstrzyknięto 3 ng cRNA każdej szczurzej podjednostki ENaC w następujący sposób:. (wypełnione trójkąty),. L535stop. (wypełnione kwadraty) lub. (otwarte kółka). Wrażliwy na amiloryd (100 .M) prąd Na + oznaczano codziennie w roztworze kąpielowym zawierającym 120 mM NaCl. Oocyty zaciśnięto przy ~ 100 mV i zmierzono metodą 2-elektrodowego docisku napięcia. Prądy są podawane jako średnia. SEM otrzymany z 17. 34 oocytów (6 niezależnych eksperymentów). * P <0,001, . kanały kontra mutant. L535stop lub. kanały. (b) Skupić się na zmutowanym. L535stop. (wypełnione kwadraty) - makroskopowe bieżące przebiegi czasowe w porównaniu z cewkami wstrzykniętymi (z otwartym krążeniem) i oocytami z otwartym wtryskiem wody (otwarte trójkąty). * P <0,001, zmutowany. L535stop. względem. - lub oocytów wstrzykniętych przez wodę [przypisy: mycie włosów szarym mydłem, badanie kału na pasożyty, lekarz medycyny pracy wrocław ] [więcej w: jednakże synonim, zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne, powiększone serce przyczyny ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: jednakże synonim, powiększone serce przyczyny, zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Powielanie Rai1 powoduje fenotypy fizyczne i behawioralne w mysim modelu dup (17) (p11.2p11.2) ad 5

Wartości reprezentują średnią. SEM. P <0,05, ** P <0,01, istotne różnice w porównaniu z myszami z miotu typu dzikiego. Test eksploracji światła i ciemności, zazwyczaj stosowany do oceny odpowiedzi związanych z lękiem, oraz test hamowania przed ładowaniem, stosowany do oceny bramkowania sensomotorycznego, nie wykazywał żadnych ogólnie istotnych różnic (P> 0,05) dla żadnej z myszy opisanych ... [Read more...]

Funkcjonalna ekspresja zmutowanego nabłonka pseudohypoaldosteronizmu typu I na kanale Na + pozbawionym regionu tworzącego pory jego podjednostka ad

Koncepcja ta jest wspierana przez ostatnie badania in vivo wykazujące, że mniej niż 20% aktywności ENaC w płucu myszy jest wystarczające, aby zapobiec noworodkowemu obrzękowi płuc, ale nie rozwija się łagodny (10) lub ciężki (11) fenotyp nerek. Aby przetestować tę drugą hipotezę, wprowadziliśmy mutację. R508stop w ludzkiej ENaC i równoważne. L535stop w szczurze ENaC i ... [Read more...]

Zwiększone tworzenie kości i zmniejszona ekspresja osteokalcyny wywołana zmniejszoną dawką Twista w zespole Saethre-Chotzen ad 7

Zgodnie z mutacją Y103X wprowadzającą kodon stop, stwierdzono zmniejszenie poziomów białka Twist w zmutowanych komórkach. Utrata funkcji twist związana z delecją bHLH może również być związana z degradacją białka (34). Ponadto stwierdziliśmy, że mutacja obniżyła poziom mRNA Twist. Zatem fenotyp indukowany przez mutację Y103X Twist w komórkach ludzkich Calvaria wynika ze zmniejszonej dawki Twist. Następnie ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

dermedicus.eu

Tags

anielskie smaki badanie synonim centrum medyczne białystok choroba synonim dantis dokumenty synonim fundacja dantis fundacje lublin gorączka cda jako synonim jednakże synonim mycie włosów szarym mydłem olej z ostropestu właściwości olej z siemienia lnianego powiększone serce przyczyny sanatorium nad morzem dla dzieci szybkowar czas gotowania słód jęczmienny gdzie kupić tatuowanie gałek ocznych wskazuje synonim wypadek przy pracy dokumenty zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne

Copyright © 2021 Medyczna fundacja dantis.