Dlatego postawiliśmy hipotezę, że hiperaktywacja ERK1 / 2 wpływa na cykliczne lub proliferacyjne komórki kardiomiocytów. W sercach a-MHC Q79R widoczne było nasilone barwienie znacznikiem proliferacji komórek Ki-67, szczególnie w komorze niezagęszczonej (figura 6A) oraz w komórkach umiejscowionych na granicach przegrody międzykomorowej i tkanki tkanki przedsionkowo-komorowej (Figura 6B). . Jednak normalne poziomy Ki-67 zostały przywrócone w a-MHC Q79R × Erkl. /. i. -MHC Q79R × Erk2 + /. serca (Figura 6, ACH). Dane te sugerują, że zwiększona proliferacja kardiomiocytów lub zmiany w kinetyce cyklu komórkowego poprzez hiperaktywację ERK1 / 2 niekorzystnie wpływają na normalne dojrzewanie komór i że ablacja nieprawidłowej aktywacji ERK1 / 2 może zapobiegać występowaniu malformacji serca za pośrednictwem Q79R. Figura 6 Redukcja hiperfosforylacji ERK1 / 2 hamuje zwiększoną proliferację kardiomiocytów. (A i B) immunobarwienie Ki-67 (E16.5, oryginalne powiększenie, x 20). Cardiomyocyty K-67 dodatnie występują w sercach a-MHC Q79R, szczególnie w mięśniu beleczkowatym (A) i na czubku przegubu komorowego mięśni (B, groty strzałek). Normalna proliferacja kardiomiocytów zostaje przywrócona w Erk1. /. i Erk2 + /. tła. (C) Ocena ilościowa komórek Ki-67P-dodatnich (n = 5). * P <0,0001. Łącznie 4500 komórek policzono w obszarach lewej, prawej i przegrody po 5 serc z każdej grupy. Dyskusja Ostatnie ludzkie analizy genetyczne zaczęły definiować udział mutacji szlaku Ras / MAPK w wywoływaniu różnych chorób wrodzonych, w tym nerwiakowłókniakowatości typu (NF1), sercowo-skórno-skórnego i zespołów Costello (34. 37). Dodatkowo, mutacje w SHP2 mogą również powodować zespół LEOPARD (38) i, przynajmniej w niektórych przypadkach, w przeciwieństwie do mutacji Q79R badanej powyżej, mutacje te prowadzą do niższej niż normalna aktywności PTP (39, 40). Wielokrotne skutki podwyższenia lub obniżenia SHP2 oraz wiele podobieństw w anomaliach czaszkowo-twarzowych, szkieletowych i sercowo-naczyniowych podkreślają plejotropową naturę aktywności Ras / MAPK w różnych typach tkanek, w których występują te zespoły ludzkie. Ponieważ mutacja SH79R SHP2 prowadzi do zwiększenia funkcji, zdecydowaliśmy się na zastosowanie podejścia transgenicznego, w którym dawka genowa i ekspresja białka mogą być zmieniane między liniami i ekspresją kontrolowaną poprzez zastosowanie swoistych stymulatorów sercowych w stadium rozwojowym. Chociaż to podejście ma wiele zalet, przedstawia pewne zastrzeżenia, z których najpoważniejszym jest rozwój fenotypu jedynie poprzez ekspresję obfitości białka z powodu nadekspresji napędzanej transgenicznie. Próbowaliśmy to kontrolować, dopasowując transgeniczne poziomy ekspresji zarówno w zmutowanych liniach Q79R i WT. Brak fenotypu, gdy normalne białko ulega nadmiernej ekspresji, potwierdza, że obserwowany fenotyp jest specyficzny dla allelu Q79R, ale nie można wykluczyć, że gdyby tylko połowa białka SHP2 w kardiomiocytach składała się z Q79R, nie występowałby żaden fenotyp. Komorowska beleczkowanie i zagęszczanie oraz zamykanie przegrody międzykomorowej są ważnymi procesami morfogenicznymi, które są ściśle związane z regulacją wzrostu serca podczas ciąży środkowej i późnej (41, 42). Niewywładzanie komorowe jest unikalnym typem choroby sercowej ogólnie występującym u niemowląt i uważa się, że jest spowodowane nieprawidłową proliferacją i / lub dojrzewaniem kardiomiocytów. Objawy kliniczne są bardzo zmienne, począwszy od braku objawów aż po niewydolność serca, z potencjalnymi powikłaniami, które obejmują arytmie i zdarzenia zakrzepowo-zatorowe. Co znamienne, często wiąże się z innymi wadami serca, takimi jak VSD i zwężenie płucne [43]. Różne mutacje genów mogą powodować niekomorakcję komorową. Na przykład, sygnalizacja neureguliny przez receptory ErbB może wywoływać przerost kardiomiocytów noworodków w hodowli przez szlak ERK1 / 2, a zarówno zarodek z niedoborem neu- guliny jak i ErbB4 brak dojrzałego mięśnia sercowego beleczkowatego (44, 45). Zarodki myszy pozbawione genu receptora kwasu retinowego Rxra wykazują istotnie zmniejszoną aktywność ERK1 / 2, prowadząc do cienkościennej komory bez kompresji ze słabo utworzoną przegrodą międzykomorową (46). Myszy z nickiem Fpp1 wykazywały również nieściskanie, VSD i zwiększoną proliferację kardiomiocytów w beleczkach (47). Nasze odkrycia, w których zwiększona aktywacja ERK1 / 2 w kardiomiocytach prowadziły do braku zagęszczania, oznaczają, że ścieżka może działać tylko w wąskich granicach, aby normalny rozwój nastąpił, chociaż alternatywne wyjaśnienie widocznej rozbieżności może leżeć w ogólnoustrojowym wyrażeniu zerowej wartości. allele przeciw specyficznej dla kardiomiocytów aktywacji ERK1 / 2 w naszym modelu [patrz też: zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne, lekarz medycyny pracy wrocław, jako synonim ] [hasła pokrewne: szybkowar czas gotowania, fundacje lublin, jako synonim ]
