Medyczna fundacja dantis

Mediacja sygnalizacji ERK1 / 2 ratuje wrodzone wady serca w mysim modelu zespołu Noonana ad

14 września 2019 by admin

Aby zbadać efekt wzmocnienia funkcji mutacji NS SHP2 na sercu, wygenerowaliśmy myszy Tg, w których normalna, WT i zmutowana SHP2 była eksprymowana specyficznie w kardiomiocytach, zarówno podczas ciąży, jak i po urodzeniu. Do tego badania wykorzystano najczęściej występującą mutację w domenie N-SH2 SHP2, Q79R (17), która ma 4,5-krotnie wyższą aktywność fosfatazy niż WT SHP2 (19). The i promotory ciężkiego łańcucha miozyny (a-MHC i y-MHC) zastosowano do ekspresji WT i Q79R SHP2 odpowiednio w komórkach płodu i po urodzeniu (Figura 1, A i B). Utworzono wiele linii (dodatkowa postać 1, materiał dodatkowy dostępny online w tym artykule; doi: 10.1172 / JCI30756DS1), a po określeniu poziomów ekspresji dla każdego konstruktu Tg wyselekcjonowaliśmy pojedyncze linie myszy pokazujące w przybliżeniu równoważne wzrosty w białku SHP2 serca. treść do kolejnych analiz (rysunek 1C). Aby potwierdzić rozwojową segregację promotorów. to jest bezczynność promotora a-MHC podczas rozwoju komorowego. całkowite białko SHP2 zmierzono od E9,5 do E16.5 w linii a-MHC Q79R przedstawionej na Figurze 1C. Zgodnie z oczekiwaniami poziomy białka SHP2 nie różniły się pomiędzy nietransgenicznymi (Ntg) i Tg zwierzętami (Figura 1D). Figura Specyficzna transgenu ekspresja transgenu w prawidłowym lub zmutowanym SHP2 w komorach. (A) Schemat ideowy Ptpn11 przedstawiający przybliżone granice egzonów dla domen funkcjonalnych i lokalizacji mutacji Q79R. (B) Konstrukty stosowane do generowania specyficznej dla kardiomiocytów ekspresji zmutowanego białka Q79R normalnego (WT) lub NS. Mysie cDNA zawierające normalny (WT) lub zmutowany (Q79R) SHP2 był połączony z promotorem P lub P-MHC w celu ekspresji transgenu. Promotor a-MHC eksprymuje transgen w kardiomiocytach komorowych pomiędzy E9.25 i E19, podczas gdy promotor a-MHC eksprymuje transgen w komorze poporodowej. Pionowe pola w promotorach a-MHC i a-MHC reprezentują egzoni niekodujących w regionie 5. Nie tłumaczonym. Sekwencję sygnałową poli-adenylowania pochodzącą z ludzkiego genu hormonu wzrostu (hGH) wstawiono poniżej cDNA. (C) Analiza Western blot tkanki serca Tg. W sercach a-MHC ekspresja białka SHP2 była zwiększona 5,3-krotnie w obu sercach WT i Q79R Tg przy E16.5. Ekspresja białka SHP2 była zwiększona odpowiednio 11,4 i 13,6 razy w sercach P-MHC WT i Q79R w 3 miesiące po urodzeniu. (D) Aby potwierdzić, że konstrukt SHP2 kierowany przez | 3-MHC2 był transkrypcyjnie nieaktywny podczas ciąży, całkowite białko SHP2 w linii Q79R (13,6-krotna nadekspresja po urodzeniu) mierzono przy E9,5 . E16.5, okres, podczas którego zagęszczanie występuje. Gdy wartości zostały znormalizowane do kontroli obciążenia GAPDH, nie zaobserwowano statystycznie istotnego wzrostu poziomów białka. W E16.5, niekomuracja komorowa, ubytki przegrody międzykomorowej (VSD) i anormalna anatomia rowka międzykomorowego były widoczne w sercach P-MHC Q79R, fenotyp podobny do tego opisanego w innym modelu myszy NS, w którym D61G SHP2 mutacja została wyrażona (18). Gdy przeanalizowano wiele linii wykazujących różne poziomy nadekspresji, nasilenie i częstość defektów zależały od dawki (Suplement 1). Przeciwnie, serca a-MHC WT, a-MHC Q79R i a-MHC WT nie wykazywały zaburzonej architektury komorowej (Figura 2A). Histologia serca po 3 miesiącach wykazała, że znacząca nadekspresja SHP2 w kardiomiocytach po urodzeniu nie wywierała wpływu ani na sercach P-MHC WT ani Q79R. W sercach a-MHC Q79R, nieurodzajowy zarodek komorowy utrzymywał się po urodzeniu (Figura 2B), bez śladów zwłóknienia (Figura 2C). Rycina 2 Wyniki histologiczne. (A) Czterokomorowy widok serc w E16.5 (oryginalne powiększenie, × 4). Niewypełnienie komorowe, VSD (groty strzałek) i nieprawidłowa anatomia rowka międzykomorowego (*) są widoczne w sercach P-MHC Q79R, podczas gdy serpentyny a-MHC WT i Q79R i A-MHC WT wydają się być normalne. (B) Wzdłużne sekcje komorowe w 3 miesiące po urodzeniu, wybarwione H & E (oryginalne powiększenie, x 4). Każdy obraz przedstawia wolną ścianę prawej komory po lewej stronie i przegrodę komorową po prawej stronie. Pomimo nadekspresji SHP2 w kardiomiocytach poporodowych, nie zaobserwowano żadnych nieprawidłowości w sercach P-MHC WT i Q79R. W sercach P-MHC Q79R niekomórki komór obserwowane w stadium embrionalnym nadal występowały po urodzeniu. (C) Barwienie trichromem w masońskim woluminie prawej komory z prostokątnego obszaru wskazanego w B (oryginalne powiększenie, × 10)
[przypisy: miód gryczany zastosowanie, fundacja dantis, tatuowanie gałek ocznych ]
[podobne: dokumenty synonim, sanatorium nad morzem dla dzieci, wskazuje synonim ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: dokumenty synonim, sanatorium nad morzem dla dzieci, wskazuje synonim

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Powielanie Rai1 powoduje fenotypy fizyczne i behawioralne w mysim modelu dup (17) (p11.2p11.2) ad 7

Biały szum był obecny w pomieszczeniu przy około 55 dB w komorze testowej. Myszy umieszczono w oświetlonej stronie i pozostawiono do swobodnego poruszania się pomiędzy 2 komorami przez 10 minut. Rejestrowano czas wejścia w ciemność i całkowitą liczbę przejść. Dane analizowano przy użyciu ANOVA 1-drożnej (genotypowej). Zaskakujące hamowanie zaskoczenia.

Nowy transgeniczny mysi model do immunologicznej oceny szczepionek na bazie minigenu DNA na bazie antygenu rakowo-płodowego ad 5

Myszy C57BL / 6-CEA-A2Kb (n = 4) immunizowano trzy razy w odstępach 2-tygodniowych atenuowanym S. typhimurium niosącym wektor pHI-691. Myszy uśmiercono 2 tygodnie po ostatniej immunizacji, a izolowane splenocyty stymulowano co tydzień napromienionymi komórkami MC-38-CEA-A2Kb. Po czterech stymulacjach komórki zebrano i przeprowadzono testy cytotoksyczności. (A) Ekspresja CD8 na stymulowanych komórkach.

Funkcjonalna ekspresja zmutowanego nabłonka pseudohypoaldosteronizmu typu I na kanale Na + pozbawionym regionu tworzącego pory jego podjednostka

Autosomalna recesywna forma pseudohypoaldosteronizmu typu I (PHA-I) jest dziedzicznym zespołem utraty soli, wynikającym z mutacji osłabienia funkcji w 3 podjednostkach nabłonkowego kanału Na + (ENaC). Zatrzymanie mutacji PHA-I (. R508stop) ENaC. uważa się, że podjednostka nie posiada drugiej domeny transbłonowej i wewnątrzkomórkowego końca COOH, regionów białka zaangażowanych w funkcję porów. Mimo to zaobserwowaliśmy mierzalny prąd ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

olejearganowe.pl

Tags

anielskie smaki badanie synonim centrum medyczne białystok choroba synonim dantis dokumenty synonim fundacja dantis fundacje lublin gorączka cda jako synonim jednakże synonim mycie włosów szarym mydłem olej z ostropestu właściwości olej z siemienia lnianego powiększone serce przyczyny sanatorium nad morzem dla dzieci szybkowar czas gotowania słód jęczmienny gdzie kupić tatuowanie gałek ocznych wskazuje synonim wypadek przy pracy dokumenty zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne

Copyright © 2021 Medyczna fundacja dantis.