Medyczna fundacja dantis

Nefritogenne mAb 5-1-6 jest skierowane na zewnątrzkomórkową domenę szczurzej nefryny ad 6

11 września 2019 by admin

Immunoblot z nie- odporną surowicą króliczą był ujemny. Reprezentatywna analiza Western blot nefryny w sieciowaniu nie-sieciowanym mAb 5-1-6 i immunoprecypitacji RVG-1. (a) Ekstrakt kłębuszkowy Triton X-100 inkubowano z mAb 5-1-6 lub RVG-1, a następnie z agarozą białkową G. Przemyte peletki rozpuszczono w redukującym buforze do próbek i rozdzielono przez 7,5% SDS-PAGE. Po elektroblottingu do nitrocelulozy membranę inkubowano z króliczą antynocefryną (1: 1000), a następnie skoniugowaną z HRP kozią anty-króliczą IgG (1: 2000). Reaktywne białka wykrywano przy użyciu techniki chemiluminescencyjnej. Specyficzne białko reaktywne w stosunku do antypineiny o masie cząsteczkowej 185 kDa jest obecne w szlaku precypitacyjnym mAb 5-1-6 i jest nieobecne na ścieżce kontrolnej. (b) Ekstrakt kłębuszkowy Triton X-100 inkubowano z mAb 5-1-6, a następnie z agarozą białkową G. Przemyty osad został rozpuszczony w redukującym buforze do próbek i rozdzielony przez 5% SDS-PAGE wraz z równymi próbkami (10. L / ścieżkę) z ekstraktu kłębuszkowego przed i po mAb 5-1-6 IP. Po elektroblotingu do nitrocelulozy błonę inkubowano z króliczą anty-nefryną (1: 1000) lub normalną króliczą Ig (1: 1000), a następnie skoniugowaną z HRP kozią anty-króliczą IgG (1: 5000). Reaktywne białka wykrywano za pomocą chemiluminescencji (ekspozycja na antynadynę: 1- do 2-sekundowej, normalna ekspozycja królika Ig: 30-sekundowa ekspozycja). Oprócz pasma 185 kDa w szlaku precypitacyjnym mAb 5-1-6, w pasmach ekstraktu kłębuszkowego występuje częściowe zubożenie nefryny z drogi poresekcyjnej (densytometria górnego prążka przed pokwitaniem: 174 Y 20,9 względem 137. 24,0, n = 5, średnia . SEM, P <0,02, test t dla pary). Immunohistologiczne porównanie dystrybucji kłębuszkowej antygenu 5-1-6 nefryny i mAb. Jak wcześniej podano, barwienie normalnej nerki mAb 5-1-6 dało zbieżny ziarnisty wzór barwienia obwodowych kłębuszkowych pętli kapilarnych (Figura 5). Antynafryna dawała identyczny wzór barwienia. Nakładanie czerwonych i zielonych obrazów fluorescencyjnych podwójnie zabarwionych sekcji potwierdziło to wrażenie. Figura 5. Kolokalizacja antygenu 5-1-6 nefryny i mAb. Dwufazowa immunofluorescencja z mAb 5-1-6 (czerwony) i króliczym przeciwciałem przeciw nefrynie (zielona) w 4. M krioskrawkach z normalnej nerki szczura Wistar. Identyczna lokalizacja nefryny i antygenu 5-1-6 mAb w prawidłowej nerce wynika z żółtego zabarwienia na złożonym obrazie reprezentującym nałożenie się 2 fluoropubułek. Powiększenie, × 400. Dyskusja Wyniki te dokumentują, że antygen zidentyfikowany przez mAb 5-1-6 jest nefryną szczura. Ustanawiają również nefrynę jako integralny składnik przepony szczelinowej podocytu i potencjalny cel urazu w nabytych, a także dziedzicznych postaciach białkowych chorób nerek. Ponadto, wyniki dostarczają nowych informacji na temat natury nefryny i możliwych wglądów w jej rolę w regulacji permerelektywności kłębuszkowej. Szczelina przepona jest uważana przez wielu za główną barierę strukturalną dla wycieku makrocząsteczek w kłębuszku. Jego struktura i skład molekularny pozostają jednak niepełne. Analiza mikroskopowa wczesnego mikroskopu elektronowego glicerolu utrwalonego w kwasie garbnikowo-glutarowym ujawniła wysoce uporządkowaną, izoporową strukturę szczelinowo-przepony, z konfiguracją drabinkową lub zamkową (15, 16). Ostatnio szybkie mrożenie preparatu z nieutrwalonej tkanki ujawniło nieporowatą podstrukturę z węższymi szczelinami filtracyjnymi niż te widoczne przy nieruchomej tkance, co sugeruje, że uprzednio zidentyfikowane pory w szczelinowo-przeponowej były po prostu artefaktem utrwalającym wynikającym z kurczenia się i cofania stopy. procesy (17, 18). Do niedawna jedynym potwierdzonym białkiem związanym z przeponą szczelinową było ZO-1 (6). Jest to białko o masie 210 kDa, które znajduje się na powierzchni cytoplazmatycznej szczeliny szczelinowej. W ubiegłym roku, w wyniku badania pacjentów z wrodzonym zespołem nerczycowym typu fińskiego, gen dla nefryny został sklonowany (4). Nefryna jest białkiem aminokwasu 1,241. Z dużą przypuszczalną domeną zewnątrzkomórkową, która zawiera 8 modułów podobnych do immunoglobulin i moduł podobny do fibronektyny typu III. Krótka domena wewnątrzkomórkowa nie ma homologii z innymi znanymi białkami, ale zawiera 9 reszt tyrozyny, które potencjalnie mogą być fosforylowane, co sugeruje możliwą rolę w sygnalizacji komórkowej. Na podstawie tych danych zasugerowano, że nefryna funkcjonuje jako receptor adhezji komórkowej, chociaż nie uzyskano jeszcze danych potwierdzających ten fakt. Jeśli chodzi o lokalizację nefryny, analiza Northern blot ujawniła specyficzną dla nerki dystrybucję, a hybrydyzacja in situ wykazała, że nefryn jest wyrażany wyłącznie w trzewiowych komórkach nabłonka kłębuszkowego (4) [przypisy: fundacja dantis, badanie synonim, centrum medyczne białystok ] [podobne: tatuowanie gałek ocznych, badanie synonim, olej z ostropestu właściwości ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: badanie synonim, olej z ostropestu właściwości, tatuowanie gałek ocznych

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Rozwój cukrzycy typu 2 po opóźnieniu wzrostu wewnątrzmacicznego u szczurów wiąże się z progresywnym wyciszaniem epigenetycznym Pdx1 ad 8

Związane kompleksy eluowano z białka A za pomocą 1% buforu SDS, a wiązania poprzeczne odwracano w obecności Rnazy A i intensywnie trawiono proteinazą K. Uwolnione DNA ekstrahowano, wytrącano i ponownie zawieszano w wodzie. Sekwencje DNA w wejściu. a próbki IP określano ilościowo względem siebie metodą PCR w czasie rzeczywistym (startery są wymienione w Tabeli dodatkowej ... [Read more...]

Mediacja sygnalizacji ERK1 / 2 ratuje wrodzone wady serca w mysim modelu zespołu Noonana

Zespół Noonana (NS) jest autosomalnym dominującym zaburzeniem charakteryzującym się szerokim spektrum wad, które najczęściej obejmują proporcjonalny niski wzrost, anomalie czaszkowo-twarzowe i wrodzoną wadę serca (CHD). NS jest najczęstszą nieromosomalną przyczyną CHD, a 80%. 90% pacjentów z NS ma zajęcie serca. Mutacje w obrębie regionu 2 homologicznej proteolitycznej fosfatazy tyrozynowej 2, fosfatazy 2 (SHP2) odpowiadają za ... [Read more...]

Polipeptyd aktywujący cyklazę przysadki adenylanowej jest fizjologicznym inhibitorem aktywacji płytek krwi czesc 4

Reakcję odwrotnej transkryptazy zakończono przez ogrzewanie przez 5 minut w 95 ° C. Zawartość cDNA normalizowano stosując startery dla P-aktyny. Następujące zestawy primerów użyto do wytworzenia specyficznych fragmentów: (3-aktyny a 5F (ACCAACTGGGACGACATGGAG) i a3R (CGTGAGGATCTTCATGAGGTAGTC) i PACAP (1 . 38) PACAP4F (GAAGCACCTGCAGTCGCTCG) i PACAP2R (TGTATACACAGGGTAGC). Wszystkie reakcje PCR (z 17 i 20 cyklami) również przeprowadzono ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

vectusgdansk.pl

Tags

anielskie smaki badanie synonim centrum medyczne białystok choroba synonim dantis dokumenty synonim fundacja dantis fundacje lublin gorączka cda jako synonim jednakże synonim mycie włosów szarym mydłem olej z ostropestu właściwości olej z siemienia lnianego powiększone serce przyczyny sanatorium nad morzem dla dzieci szybkowar czas gotowania słód jęczmienny gdzie kupić tatuowanie gałek ocznych wskazuje synonim wypadek przy pracy dokumenty zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne

Copyright © 2021 Medyczna fundacja dantis.