Medyczna fundacja dantis

Nowy transgeniczny mysi model do immunologicznej oceny szczepionek na bazie minigenu DNA na bazie antygenu rakowo-płodowego czesc 4

16 września 2019 by admin

Grupy myszy C57BL / 6-CEA-A2Kb (n = 4) immunizowano trzy razy w odstępach 2-tygodniowych atenuowanym S. typhimurium z albo wektorami pHI-CAP1-6D, albo pHI-691. Myszy uśmiercono 2 tygodnie po ostatniej immunizacji, a izolowane splenocyty frakcjonowano na CD8 + lub CD8a. populacje. Każdą populację komórek stymulowano napromieniowanymi komórkami MC-38-CEA-A2Kb przez 5 dni. Następnie przeprowadzono testy cytotoksyczności z komórkami T2 obciążonymi CEA691 jako celami. (A) Czystość każdej subpopulacji po MACS. (B) Cytotoksyczność każdej populacji komórek przy stosunku E / T 20: 1. (C) Cytotoksyczność populacji CD8 + przedstawiono przy różnych stosunkach E / T. Gdy komórki CD8 + zostały wzbogacone przez MACS, procent limfocytów T CD8 + wzrósł z około 30% w niefrakcjonowanej hodowli do ponad 90% w hodowli komórkowej CD8 +. Jednakże frakcja CD8 + nie wykazywała wyższych szybkości zabijania (Figura 4C) w porównaniu z niefrakcjonowanymi splenocytami (Figura 3A), prawdopodobnie z powodu wymogu CD8. Komórki T dla optymalnej proliferacji w hodowli komórkowej. Jedną z linii dowodów potwierdzających ten pogląd jest to, że hodowla frakcji CD8 + powodowała niższą ekspresję CD8 w porównaniu z niefrakcjonowanymi hodowlanymi splenocytami (dane nie przedstawione). Podsumowując, te dane wskazują, że szczepionka minigene pHI-CEA691 może skutecznie indukować ograniczoną HLA-A2c, specyficzną dla CEA691 odpowiedź CTL u podwójnie transgenicznych myszy CEA-A2Kb. Ochronna odporność przeciwko komórkom raka okrężnicy CEA-A2Kb. Ograniczone do HLA-A2a, specyficzne dla CEA691 CTL, indukowane przez szczepionkę DNA minigenezy pHI-691, rozpoznały i zabiły podwójnie transdukowane MC-38 CEA-A2Kb komórki mysiego okrężnicy, to znaczy komórki MC-38-CEA-A2Kb, których ekspresja powierzchniowa HLA-A2 i CEA jest przedstawiona na Figurze 5A (po lewej). Proces ten wykazano przez izolację splenocytów z myszy 2 tygodnie po ostatniej immunizacji i stymulowanie ich in vitro naświetlanymi komórkami MC-38-CEA-A2Kb przez 5 dni, a następnie testowanie ich w standardowych testach uwalniania 51Cr. Zgodnie z oczekiwaniem, splenocyty z grupy myszy immunizowanych szczepionką pHI-691 wykazały najbardziej skuteczne zabijanie cytotoksyczne komórek docelowych MC-38-CEA-A2Kb w porównaniu z grupami kontrolnymi pCMV, pHI i pHI-CAP1-6D (P <0,05). 0,0005, P <0,001 i P <0,005 przy stosunku E / T wynoszącym odpowiednio 100: [Figura 5B]). Ta zwiększona zdolność do zabijania wydaje się być ograniczona HLA-A2, ponieważ procent zabijania HLA-A2. Komórki MC-38-CEA (ekspresja HLA-A2 i CEA pokazana na Figurze 5A [po prawej]) lub macierzyste komórki docelowe MC-38 nie różniły się istotnie pomiędzy grupami eksperymentalnymi (P> 0,05 przy stosunku E / T wynoszącym 100: [Figura 5C i dane nie pokazane]). Podsumowując, dane te sugerują, że te komórki odpornościowe, które przypuszczalnie są ograniczone HLA-A2 i CTL specyficzne dla CEA691, indukowane przez szczepionkę pHI-691, są rzeczywiście zdolne do rozpoznawania i zabijania podwójnie transfekowanych komórek MC-38 CEA-A2Kb in vitro. Figura 5 Szczepionka minigenu DNA pHI-691 indukuje ograniczone zabijanie HLA-A2y komórek MC-38-CEA-A2Kb. (A) Ekspresja powierzchni HLA-A2 i CEA przez MC-38-CEA-A2Kb (po lewej) i MC-38-CEA (po prawej). Komórki nowotworowe przemyto i inkubowano z izotypowym kontrolnym Ab (cienkie przerywane linie), anty-HLA-A2 (cienkie linie ciągłe) lub anty-CEA (ciężkie linie ciągłe) i barwiono sprzężonym z PE (Fab.) 2 kozim . mysie Ig Ab. Grupy myszy C57BL / 6-CEA-A2Kb (n = 4) immunizowano trzy razy w odstępach 2-tygodniowych atenuowanym S. typhimurium zawierającym wskazane wektory. Myszy uśmiercono 2 tygodnie po ostatniej immunizacji i izolowane splenocyty stymulowano napromieniowanymi komórkami MC-38-CEA-A2Kb przez 5 dni. Następnie przeprowadzono testy cytotoksyczności z (B) MC-38-CEA-A2Kb lub (C) MC-38-CEA jako komórkami docelowymi. maksimum, maksimum. W celu przetestowania swoistości tej odpowiedzi immunologicznej, splenocyty izolowane z grupy zaszczepionych za pomocą pHI-691 stymulowano co tydzień napromienionymi komórkami MC-38-CEA-A2Kb. Komórki te, po ponownej stymulacji czterokrotnie, miały ponad 86% CD8 +, co wykazano za pomocą cytometrii przepływowej (Figura 6A). Te stymulowane komórki następnie zebrano i analizowano za pomocą testów uwalniania 51Cr przeciwko komórkom BLA pozbawionym lub obciążonym peptydem HLA-A2 +. W testach uwalniania 51Cr znacznie poprawiono skuteczność zabijania cytotoksycznego komórek B3 obciążonych CEA691; to znaczy, zaobserwowano znacznie wyższy procent zabijania przy niższych stosunkach E / T, przy czym specyficzność nadal jest utrzymywana, jak wskazuje niższy procent specyficznego zabijania nieobciążonych komórek B3 (Figura 6B). Figura 6 Protezy stymulacja komórkami MC-38-CEA-A2Kb prowadzi do zwiększenia CTL swoistych dla CLA691 wzbogaconych w HLA-A2a.
[podobne: badanie kału na pasożyty, konwerter jednostek długości, miód gryczany zastosowanie ]
[patrz też: centrum medyczne białystok, gorączka cda, anielskie smaki ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: anielskie smaki, centrum medyczne białystok, gorączka cda

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Nefritogenne mAb 5-1-6 jest skierowane na zewnątrzkomórkową domenę szczurzej nefryny cd

Po 3 przemyciach PBS, kłębuszki solubilizowano w buforze RIPA (1% Nonidet P-40, 0,5% deoksycholanu sodu, 0,1% dodecylosiarczanu sodu w 50 mM Tris i 150 mM NaCl [pH 8,0]) z PI. Ekstrakt detergentowy wirowano przy 16,000 g w mikrowirówce stołowej przez 30 minut w celu usunięcia nierozpuszczalnego materiału, a supernatant inkubowano ze sprzężonym z agarozem króliczym ... [Read more...]

Epidermalny HLA-DR i poprawa reaktywności skórnej na toksyny superantygenowe w łuszczycy ad 8

Warto zauważyć, że 4 z 5 osób z łuszczycą, u których stwierdzono najwyższą reaktywność skórną w stosunku do egzotoksyn, również wykazywało zjawisko Koebner po biopsji skóry. Podsumowując, odkrycia te sugerują również, że konieczna jest modyfikacja naskórka w celu optymalnej indukcji zapalenia skóry wywołanego SAg w łuszczycy. Modyfikacja naskórka powoduje zwiększoną ekspozycję keratynocytów eksprymujących MHC klasy ... [Read more...]

Mediacja sygnalizacji ERK1 / 2 ratuje wrodzone wady serca w mysim modelu zespołu Noonana ad

Aby zbadać efekt wzmocnienia funkcji mutacji NS SHP2 na sercu, wygenerowaliśmy myszy Tg, w których normalna, WT i zmutowana SHP2 była eksprymowana specyficznie w kardiomiocytach, zarówno podczas ciąży, jak i po urodzeniu. Do tego badania wykorzystano najczęściej występującą mutację w domenie N-SH2 SHP2, Q79R (17), która ma 4,5-krotnie wyższą aktywność fosfatazy niż WT SHP2 (19). ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

psychoterapia przasnysz

Tags

anielskie smaki badanie synonim centrum medyczne białystok choroba synonim dantis dokumenty synonim fundacja dantis fundacje lublin gorączka cda jako synonim jednakże synonim mycie włosów szarym mydłem olej z ostropestu właściwości olej z siemienia lnianego powiększone serce przyczyny sanatorium nad morzem dla dzieci szybkowar czas gotowania słód jęczmienny gdzie kupić tatuowanie gałek ocznych wskazuje synonim wypadek przy pracy dokumenty zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne

Copyright © 2021 Medyczna fundacja dantis.