Związane kompleksy eluowano z białka A za pomocą 1% buforu SDS, a wiązania poprzeczne odwracano w obecności Rnazy A i intensywnie trawiono proteinazą K. Uwolnione DNA ekstrahowano, wytrącano i ponownie zawieszano w wodzie. Sekwencje DNA w wejściu. a próbki IP określano ilościowo względem siebie metodą PCR w czasie rzeczywistym (startery są wymienione w Tabeli dodatkowej 1). W celu ustalenia, czy odwrócenie modyfikacji epigenetycznych przywróci ekspresję Pdx1 u zwierząt z IUGR, wysepki zebrano z 2-tygodniowego IUGR i młodych kontrolnych i hodowano przez 5 dni w pożywce hodowlanej RPMI 1640 zawierającej 11 mM glukozy, uzupełnionej 10% płodową surowicą bydlęcą. 2 mM L-glutaminy, 50 IU / ml penicyliny i 50 mg / ml streptomycyny (Gibco BRL) w obecności i przy braku 10. M TSA i / lub 1. M 5-AzaC, które hamowały odpowiednio HDAC i Dnmt1 . Statystyka. Analizy statystyczne przeprowadzono za pomocą analizy wariancji i dwustronnego testu t-Studenta z niesparowanym t. Wartość AP mniejsza niż 0,05 została uznana za znaczącą. Materiały uzupełniające Zobacz dane uzupełniające Podziękowania Niniejsze badanie zostało wsparte grantem NIH DK55704 (dla RA Simmons) i DK062965 (dla RA Simmons i DA Stoffers). Dziękujemy Hongshun Niu za jego fachową pomoc techniczną. Przypisy Niestandardowe stosowane skróty: 5-AzaC, 5-aza-2 P-deoksycytydyna; Dnmt, metylotransferaza DNA; HDAC, deacetylaza histonowa; H3K4, histon 3 lizyna 4; H3K9, histon 3 lizyna 9; H3K4me3, trimetylowanie lizyny 4 w H3; H3K9me2, dimetylacja lizyny 9 w H3; IUGR, opóźnienie wzrostu wewnątrzmacicznego; TSA, trichostatyna A. Konflikt interesów: Autorzy zadeklarowali brak konfliktu interesów. Informacje referencyjne: J. Clin. Invest.118: 2316. 2324 (2008). doi: 10.1172 / JCI33655
[podobne: miód gryczany zastosowanie, powiększone serce przyczyny, mycie włosów szarym mydłem ]
[patrz też: dantis, dokumenty synonim, sanatorium nad morzem dla dzieci ]
