Medyczna fundacja dantis

Zwiększone tworzenie kości i zmniejszona ekspresja osteokalcyny wywołana zmniejszoną dawką Twista w zespole Saethre-Chotzen ad 5

2 września 2019 by admin

W tych warunkach poziomy mRNA Twist były zmniejszone w komórkach M-Tw w porównaniu z komórkami Nl hodowanymi zarówno w konfluencji wstępnej, jak i konfluencji (Figura 2). Było to związane ze znaczącymi zmianami w ekspresji genów markerowych osteoblastów. Poziomy mRNA ALP były znacznie zwiększone (dwukrotnie do trzykrotnego) w komórkach M-Tw w porównaniu z komórkami NI zarówno w konfluencji wstępnej, jak i konfluencji (Figura 4, aib). Poziomy mRNA COLIA1 były również znacząco zwiększone w komórkach zmutowanych w porównaniu z komórkami NI hodowanymi w tej samej gęstości (Figura 4, aib). Przeciwnie, komórki M-Tw wykazywały znaczny spadek poziomów mRNA OC w porównaniu z komórkami NI (Figura 4a). Ilościowe analizy ekspresji genów potwierdziły, że poziomy transkryptów mRNA OC były dwukrotnie lub trzykrotnie niższe w komórkach M-Tw w porównaniu z komórkami N1 (Figura 4b). Podobne wyniki uzyskano w konfluencji wstępnej i konfluencji, potwierdzając niezależną zmianę wzrostu ekspresji OC w komórkach M-Tw. Tak więc mutacja Y103X Twist powodująca zmniejszone dawkowanie Twist w ludzkich komórkach Calvaria jest związana ze zwiększoną ALP i COLIA1, ale zmniejszoną ekspresją genu OC, niezależnie od wzrostu komórki. Rycina 4Zmniejszone dawkowanie skrętu zmniejsza ekspresję OC w osteoblastach kości piętowej. Kontrolne (NI) i zmutowane (M-Tw) komórki kalibii hodowano aż do osiągnięcia wstępnego zlepienia (PC, 2 dni) lub konfluencji (C, 4 dni) i określono ekspresję genów markera osteoblastów. (a) Całkowity komórkowy RNA poddano odwrotnej transkrypcji i cDNA powielono przez PCR w celu zbadania ekspresji transkryptów ALP, COLIA1, OC lub GAPDH, a następnie analizy Southern blot. (b) Analizę densytometryczną poziomów mRNA przeprowadzono po korekcie GAPDH (średnia . SEM z trzech eksperymentów, AP <0,05 w porównaniu do komórek N1). Zmniejszone dawkowanie skrętu zwiększa osteogenezę in vitro. Następnie wykonaliśmy analizy in vitro, aby określić wpływ mutacji Y103X Twist na tworzenie macierzy przez osteoblasty z kalwarii podczas osteogenezy in vitro. Podczas hodowli w obecności kwasu askorbinowego, który sprzyja powstawaniu macierzy i osteogenezy in vitro (20), komórki M-Tw i Nl szybko wytwarzają struktury ALP + podobne do guzków. Jednak komórki M-Tw wytwarzały większe i większe guzki niż komórki NI w tym samym okresie czasu (8 dni) (Figura 5a). Analiza ilościowa wykazała, że komórki M-Tw wytwarzają czterokrotnie więcej guzków niż komórki N1 (Figura 5b), co pokazuje zwiększoną zdolność osteogeniczną komórek M-Tw in vitro. W celu dalszej oceny zdolności zmutowanych komórek do tworzenia matrycy kolagenowej in vitro, komórki M-Tw hodowano w agregatach, w warunkach sprzyjających osteogenezie w hodowlach ludzkich komórek Calvaria (23, 25). W tych warunkach komórki M-Tw tworzyły dużą ilość zwapniałej i niezwapnionej macierzy w agregatach po 14 dniach hodowli (Figura 6a). W przeciwieństwie do tego, komórki Nl formowały jedynie małe obszary matrycy (Figura 6b). Analiza biochemiczna przeprowadzona w równoległych hodowlach agregatów wykazała, że aktywność ALP była zwiększona w hodowlach komórek M-Tw w porównaniu z komórkami N1 podczas pierwszych 3 dni hodowli w agregatach (Figura 6c). Zwiększona osteogeneza in vitro była również związana z wyraźnym wzrostem syntezy kolagenu typu I, jak ujawniły poziomy P1CP (Figura 6d). Potwierdza to, że zmniejszone dawkowanie Twist wzmacnia te markery osteoblastów w zmutowanych komórkach podczas osteogenezy in vitro i zwiększa tworzenie kolagenowych macierzy przez komórki M-Tw podczas osteogenezy in vitro. Figura 5 Zmniejszone dawkowanie skrętu zwiększa tworzenie struktur guzkowych przez zmutowane osteoblasty z kalwarii. Kontrolne (NI) i zmutowane (M-Tw) komórki kalibii wysiano w tej samej gęstości w obecności kwasu askorbinowego w celu zaindukowania tworzenia się guzków. (a) Pokazano tworzenie guzków (strzałki w górnym panelu, x 125) i tworzenie macierzy (M w dolnym panelu, x 250). Liczbę guzków ALP + określono po 8 dniach hodowli (b). Dane są średnie. SEM z trzech do czterech kultur. AP <0,01 vs. komórki Nl. Figura 6 Zmniejszone dawkowanie skrętu zwiększa osteogenezę in vitro przez zmutowane komórki Calvaria. Kontrolne (NI) i zmutowane (M-Tw) komórki kalibii hodowano w agregatach. Histologiczne sekcje o grubości 5 urn barwione trichromem Goldnera wykazały zwiększoną ilość osteoidu (O) i zwapniałą matrycę (M) utworzoną przez komórki M-Tw (a) w porównaniu z komórkami N1 (b) po 14 dniach hodowli (x 250 ). (c) Zwiększona aktywność ALP i (d) synteza kolagenu typu I, określona na podstawie poziomów P1CP w komórkach M-Tw w porównaniu z komórkami Nl hodowanymi w agregatach. Dane są średnie. SEM z trzech do czterech kultur. AP <0,05 względem komórek N1. Zredukowana dawka skrętu zwiększa syntezę macierzy in vivo. W celu dalszego scharakteryzowania zdolności osteogennej zmutowanych komórek Twist in vivo, przeanalizowaliśmy zdolność tworzenia matrycy komórek M-Tw hodowanych na porowatych ceramicznych materiałach HA, które zostały wszczepione myszom nagim [hasła pokrewne: badanie kału na pasożyty, olej z siemienia lnianego, ziaja krem liście manuka ] [więcej w: powiększone serce przyczyny, dantis, dokumenty synonim ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: dantis, dokumenty synonim, powiększone serce przyczyny

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Anafilatoksyna C5a jest głównym regulatorem aktywujących względem hamujących FcyR w chorobie płuc indukowanej przez kompleks immunologiczny ad 6

IC-modulowana modulacja FcyR, która nie była obserwowana w kontrolach Ab, jest zależna od obecności C5aR, jak zweryfikowano u myszy z mutacją C5aR, nie wykazujących indukcji transkrypcyjnej FcyRIIIa / r. łańcuchy lub supresja FcyRII (figura 7). W przeciwieństwie do FcyR, ekspresja mRNA C5aR pozostawała niezmieniona w AM w traktowanych IC C57BL / 6 i FcyRIIIl / ... [Read more...]

Mediacja sygnalizacji ERK1 / 2 ratuje wrodzone wady serca w mysim modelu zespołu Noonana ad

Aby zbadać efekt wzmocnienia funkcji mutacji NS SHP2 na sercu, wygenerowaliśmy myszy Tg, w których normalna, WT i zmutowana SHP2 była eksprymowana specyficznie w kardiomiocytach, zarówno podczas ciąży, jak i po urodzeniu. Do tego badania wykorzystano najczęściej występującą mutację w domenie N-SH2 SHP2, Q79R (17), która ma 4,5-krotnie wyższą aktywność fosfatazy niż WT SHP2 (19). ... [Read more...]

poradnia kardiologiczna warszawa anin

Innymi słowy, nieobrobione teoretyczne modelowanie historii populacji ludzi sugeruje, że warianty, które mają wysoką częstość populacji jako całość, i które prawdopodobnie będą odpowiedzialne za złożone cechy (powszechna choroba – powszechna hipoteza wariantu), będą na ogół bardzo stare, a zatem towarzyszy temu raczej niewielka nierównowaga sprzężeń (90). Ilościowo może to przekładać się na dziesiątki regionów genowych, ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

praca-lodz.com.pl

Tags

anielskie smaki badanie synonim centrum medyczne białystok choroba synonim dantis dokumenty synonim fundacja dantis fundacje lublin gorączka cda jako synonim jednakże synonim mycie włosów szarym mydłem olej z ostropestu właściwości olej z siemienia lnianego powiększone serce przyczyny sanatorium nad morzem dla dzieci szybkowar czas gotowania słód jęczmienny gdzie kupić tatuowanie gałek ocznych wskazuje synonim wypadek przy pracy dokumenty zus dobrowolne ubezpieczenie zdrowotne

Copyright © 2021 Medyczna fundacja dantis.